Analizie płynu mózgowo-rdzeniowego (CSF)

PMR (płyn mózgowo-rdzeniowego lub CSF) - płyn biologiczny, niezbędnych dla funkcjonowania OUN. Jego badanie jest jednym z najważniejszych rodzajów badań laboratoryjnych. Składa się on z fazy pre-analityczną (przygotowanie tematu, zbieranie materiału i jego dostawy do laboratorium), analityczny (właściwie robi badania) i postanalytical (zapis wyniku). Jedynie prawidłowe wykonanie wszystkich manipulacji na każdym z tych etapów określa jakość analizy.

Płyn mózgowo-rdzeniowy (CSF), są utworzone w splocie naczyniówkowym w komorach mózgu. U dorosłego człowieka przestrzeni subarhnoidalnyh jednocześnie i krąży do komór mózgu 110-160 ml CSF, w rdzeniu kanału - 50-70 ml. Alkohol jest ukształtowany w sposób ciągły z szybkością 0,2-0,8 ml / min, w zależności od ciśnienia wewnątrzczaszkowego. W zdrowej osoby dzień tworzą 350-1150 ml CSF.

Roztwór uzyskuje się przez nakłucie kanału kręgowego, częściej - lędźwiowego - zgodnie z metodami dobrze znanymi neurologów i neurochirurgii. Jego pierwsze krople są usuwane ( „Droga” we krwi). Następnie zbiera się ciecz co najmniej dwóch rur: rury w konwencjonalnych (chemiczną, ultrawirowania) do ogólnej analizie klinicznej i chemiczne, sterylne - do badania bakteriologicznego. Na formularzu skierowania lekarza na badania CSF powinna określać nie tylko nazwisko pacjenta, ale także diagnozę kliniczną i cel badania.

Należy pamiętać, że dostarczane do próbek laboratoryjnych alkohol powinny być chronione przed pergrevaniya lub chłodzony i próbek do testów wykrywających polisacharydów bakteryjnych serogicheskih powinien być ogrzany na łaźni wodnej w ciągu 3 minut.

Rzeczywista badania laboratoryjne płynu mózgowo-rdzeniowego (faza analizy) odbywa się zgodnie z zasadami przyjętymi w laboratorium klinicznym w analizie wszelkich płynów ustrojowych, i zawiera następujące kroki:

- Analiza makroskopowa - ocena właściwości fizykochemicznych (rozmiar, kolor, charakter)
- zliczanie liczby komórek,
- Mikroskopia rodzimy przygotowanie i cytologia kolorowe preparata-
- Badania biochemiczne,
- Badania mikrobiologiczne (jeśli jest to wskazane).

Uważamy to za stosowne i pouczające w niektórych przypadkach uzupełniać badanie płynu mózgowo-rdzeniowego immunologicznych i ewentualnie - innych badań, których znaczenie jest omawiany w literaturze.

Dekodowanie wydajność CSF

Normalna bezbarwny CSF i porozrachna (w wodzie destylowanej, w porównaniu z których własności fizyczne ogólnie opisać CSF).

Ług szare lub szaro-zielone są zazwyczaj spowodowane przez domieszkę bakterii i leukocytów. Czerwony CSF różnej intensywności (eritrohromiya) napędzany przez zmieszanie z erytrocytami zachodzi, gdy świeże krwotok lub uszkodzenia mózgu. Wizualnie pristutstvuyut erytrocytów jest wykrywany, gdy zawartość więcej niż 500-600 mikrolitrów.

W procesach chorobowych może być ciekły ksantohromnoy - w kolorze żółtym lub żółto-brązowy produkty rozkładu hemoglobiny. Również rozważyć xanthosis false - likier koloru spowodowanych przez narkotyki. Rzadziej spotykamy zielonkawy CSF (ropne zapalenie opon mózgowych, ropień mózgu). W literaturze opisano, kolor i korchnevy alkohol - wybuchu torbiele czaszkogardlak w drodze płynu mózgowo-rdzeniowego.

Zmętnienie cieczy mogą wynikać z zanieczyszczeń krwinek lub mikroorganizmów. W tym ostatnim przypadku, mgła może być usuwany przez odwirowanie. Gdy zawartość w CSF zwiększona ilość grubych białka staje się opalizujący.

Względna gęstość płynu mózgowo-rdzeniowego, otrzymanego przez punkcję lędźwiową, 1,006-1,007. Gdy zapalenie opon mózgowo-rdzeniowych, uraz mózgu względnej gęstości płynu mózgowo-rdzeniowego wzrasta do 1015. Zmniejsza nadprodukcji płynu mózgowo-rdzeniowego (wodogłowie).

Gdy podwyższony poziom fibrynogenu w płynie mózgowo-rdzeniowym jest utworzona włóknikowe folii lub skrzepu, który występuje częściej w gruźliczego zapalenia opon mózgowych. Czasami rura płynem pozostawiono w temperaturze pokojowej na jeden dzień (jeżeli jest to konieczne, aby dokładnie ustawić - czy powłoka uformowana). W obecności włóknikowe jego folii wypreparowującym igły przenosi się na szkiełku i barwiono Ziehl-Neelsena i metoda identyfikacji prątków. Normalna CSF 98-99% wody.

Niemniej jednak, badanie składu chemicznego jest ważnym zadaniem. Polega ona na określaniu poziomu białka, glukozy i chlorku i jest uzupełniony przez inne wskaźniki w wielu przypadkach.

Białka w płynie mózgowo-rdzeniowym

Więcej niż 80% białka płynu mózgowo-rdzeniowego z osocza przepływa przez ultrafiltrację. Zawartość białka w normach w różnych części: część komory - 0,05-0,15 g / l, cisternal 0,15-0,25 g / l, lędźwiowego 0.15-0.35 g / l. W celu oznaczenia stężenia białek w płynie mózgowo-rdzeniowym, można zastosować dowolny ze standardowych metod (kwasem sulfosalicylowym i siarczan amonu, i inne). Zwiększona zawartość białek w płynie mózgowo-rdzeniowym (giperproteinarhiya) może wynikać z różnych czynników chorobotwórczych (tabela 1).

Badanie CSF umożliwia nie tylko w celu wyjaśnienia natury procesu chorobowego, ale także ocenić stan barierę krew-mózg. Wskaźnik dla tych celów może być albumina, pod warunkiem, że poziom w CSF jest określana za pomocą metod immunochemicznych. Określenie albuminy przeprowadzone w związku z tym, że jako białko krwi nie jest syntetyzowany lokalnie a zatem może być „znacznik” immunoglobuliny infiltrowane od przepływu krwi spowodowane zaburzeniem bariery przepuszczalności. Jednoczesne oznaczanie albumin w surowicy (osoczu krwi i płynu mózgowo-rdzeniowego) albuminy pozwala nam obliczyć indeks:

Gdy nienaruszona bariera krew-mózg, wskaźnik ten jest mniejszy niż 9, z umiarkowanym uszkodzeniem - 9-14, z widocznym - 14-30, z ciężkim uszkodzeniem - 30-100 i wzrostu o więcej niż 100 oznacza całkowite uszkodzenie bariery.

W ostatnich latach wzrost zainteresowania białka specyficzne dla OUN ługu - neuronów enolazy, S-100 białko, białko podstawowe mieliny (MBP) i innych. Jednym z najbardziej obiecujących wśród nich dla celów klinicznych wydaje MBP. W normalnym CSF jest praktycznie nieobecny (jego stężenie nie przekracza 4 mg / l), a pojawia się tylko w warunkach patologicznych. Ta funkcja laboratorium nie jest specyficzna dla niektórych jednostek klinicznych, ale odzwierciedla rozmiar uszkodzeń (głównie związane ze zniszczeniem białego ciała stałego). Niektórzy autorzy uważają, że jest to obiecujący definicja MBP w CSF do monitorowania neuroAIDS. Niestety, dzisiaj pozostają problemy związane z bezpośredniego oznaczania stężenia białka.

Glukozy w płynie mózgowo-rdzeniowym

Glukoza występuje w płynie mózgowo-rdzeniowym w normalnym stężeniu 2.00-4.18 mmol / l. Wartość ta podlega znacznym wahaniom nawet u zdrowych osób w zależności od reżimu żywności, aktywności fizycznej oraz innych czynników. Dokładna ocena poziomu glukozy w płynie mózgowo-rdzeniowym do jednoczesnego określenia jego poziomu we krwi, gdzie normalnie jest 2 razy wyższy. Podwyższone poziomy cukru we krwi (giperglikoarhiya) występuje w cukrzycy, ostre zapalenie mózgu, zaburzenia krążenia, niedokrwienia i innych chorób. Gipoglikoarhiya widać z zapaleniem opon mózgowych o różnej etiologii, lub aseptycznego zapalenia, nowotworowych zmian w mózgu i błony, co najmniej - z infekcji opryszczki, krwotoku podpajęczynówkowego.

Pewną przewagę nad glukozą jako markera diagnostycznego jest mleczan (kwas mlekowy), a jego stężenie w płynie mózgowo-rdzeniowym (1,2-2,1 mmol / l) jest niezależne od tego, w krwi. Jej poziom znacznie wzrasta w różnych stanach związanych z zaburzeniami metabolizmu energetycznego - zapalenie opon mózgowych, zwłaszcza - spowodowane przez bakterie Gram-dodatnie, niedotlenienie mózgu flory i niektórych innych.

Chlorki w płynie mózgowo-rdzeniowym

Chlorki - zawartości w normalnym płynu mózgowo - 118-132 mmoli / litr. Zwiększone stężenie w CSF występuje w naruszenia ich usunięciu z organizmu (nerki, serca), w chorobach zwyrodnieniowych i nowotworów OUN. Zmniejszenie zawartości chlorku oznaczona zapalenie mózgu i zapalenie opon mózgowych.

Enzymy w płynie mózgowo-rdzeniowym

Alkohol charakteryzuje się niską aktywnością enzymów zawartych w nim. Modyfikacja aktywności enzymu w CSF w różnych chorób są zazwyczaj niespecyficzne i równoległe opisane zmiany we krwi u tych chorób (tabela 2). Inne podejście zasługuje interpretację zmian w aktywności fosfokinazy kreatyny (CPK). Ten enzym w tkankach trzech frakcji, które charakteryzują się nie tylko różnicami cząsteczkowej, ale również od charakteru dystrybucji w tkankach: CK-MB (mięśnia sercowego), CK-MM (mięśnie) CK-BB (mózg). Jeżeli całkowita aktywność CK w CSF ma podstawową wartość diagnostyczną (może być zwiększana, gdy nowotwór, udar mózgu, padaczka i inne choroby), frakcja CK-BB jest stosunkowo specyficznym markerem uszkodzonej tkanki mózgowej, a jej aktywność w CSF jest skorelowany ze skalą Glasgow.

Liczbę komórek i płynu mózgowo-rdzeniowego cytogram

W badaniu płynach biologicznych i płynie mózgowo-rdzeniowym w tym typowo policzyć liczbę komórek w cytogram i wymazów barwionego azureozinom (Romanowsky-Giemsa Nocht, Pappenheim). Zliczanie elementów komórek w płynie mózgowo-rdzeniowym (oznaczanie cytozy) wytworzoną za pomocą komory Fuchs-Rosenthala wstępnej hodowli to odczynnik Samson 10 razy. Korzystanie tylko dany barwnik, niż każda inna. Pozwala komórek do barwienia przez 15 minut, po czym komórki zachowują niezmieniony do 2 godzin.

Liczbę komórek w całej komórce dzieli się przez 3 tak otrzymanego cytozy w 1 ul. Dla większej dokładności, należy rozważyć liczbę komórek w trzech komór. Gdy Fuchs-Rosenthala brak komora Goryaeva aparat działa przez liczenie komórek w całej sieci, jak na trzy komory, to wynik jest mnożony przez 0,4. Do tej pory, nie ma rozbieżności w jednostkach liczby komórek - liczbę komórek w komorze na 1 mm lub 1 litra. Prawdopodobnie jest to jednak korzystne, aby wyrazić liczbę komórek w mikrolitrów cytoza. Aby obliczyć liczbę krwinek białych i czerwonych krwinek w płynie mózgowo-rdzeniowym może być zatrudniony i systemy zautomatyzowane.

Zwiększona zawartość komórek w CSF (pleocytoza) często pojawia się w leczeniu chorób zapalnych, w mniejszym stopniu - z podrażnieniem opon mózgowo-rdzeniowych. Najwybitniejszym pleocytoza widziana z zakażeniami bakteryjnymi, grzybiczymi uszkodzeń mózgu i gruźliczego zapalenia opon mózgowych. Epilepsji, pajęczynówki, wodogłowie, procesów zwyrodnieniowych, oraz innych chorób ośrodkowego układu liczby nerwowego komórek pozostaje normalnie.

Barwienie komórek rodzimy odczynnik przygotowanie Samson pozwala wystarczająco wiarygodnie zróżnicowanych komórek. Jednak bardziej dokładne jego cechy morfologiczne uzyskano po utrwaleniu i wybarwieniu preparatach cytologicznych wytworzone. Nowoczesne podejście do wytwarzania takich produktów wymaga użycia Cytospin. Jednak nawet w Stanach Zjednoczonych mają tylko 55% laboratoriów. Dlatego w praktyce znacznie łatwiejszy sposób - osadzanie komórek na szkiełku. Preparaty powinny być dobrze wysuszono na powietrzu, a następnie malowane.

Zabarwione próbki są elementami liczbą komórek. Reprezentowane są głównie przez komórki krwi (zwykle - limfocytów i neutrofilów, co najmniej - monocyty, eozynofile, bazofile) może spełniać komórki plazmatyczne i maszt, makrofagi, ziarniste kulki (postać zwyrodnieniowe specjalny typ makrofagów - lipofagov w stanie otłuszczeniem), komórki arahnoendoteliya, epindimy , Morfologia tych elementów komórkowych są dobrze znane lekarzom i Badania laboratoryjne opisano szczegółowo w wielu podręcznikach. Poziom i rodzaj CSF cytogram pleocytoza pozwala określić charakter procesu chorobowego (tabela 3).

Leukocytoza często towarzyszy ostrego zakażenia (lokalnej i rozproszonego opon mózgowo-rdzeniowych). CSF eozynofilia jest rzadko - gdy bąblowicy mózgu, zapalenie opon mózgowych eozynofilowe. CSF eozynofilia nie koreluje z reguły z liczby eozynofilów we krwi. Limfocytarne pleocytoza CSF występuje wirusowe zapalenie opon mózgowych, stwardnienie rozsiane, przewlekła faza gruźlicze zapalenie opon mózgowych po operacjach na błonach mózgu. W procesach patologicznych ośrodkowego układu nerwowego obserwowano polimorfizmu limfocytów, wśród których są włączone. Charakteryzują się one obecnością obfitej cytoplazmie z pojedynczymi blado azurofilnych granulek, niektóre komórki otshnurovku lub rozdrobnienie cytoplazmie (clasmatosis). Komórki plazmatyczne pojawiają się w cytogram w wirusowym zapaleniu opon mózgowych lub bakteryjnego, podostre procesów zapalnych, w okresie wychodzenia z Kiła mózgowo-rdzeniowa. Monocyty poddawanych degeneracji w płynie mózgowo-rdzeniowym szybciej limfocytów obserwowanych stwardnienie rozsiane, postępujące zapalenie mózgu, przewlekłego zapalenia tlącego. Makrofagi - „sanitariusze” likier, pojawiają się krwotoki, zakażenia, urazowe i martwicę niedokrwienną.

Czasami CSF wykrywane nieprawidłowe komórki - elementy, które przez ich cechy morfologiczne nie mogą być przypisane do określonych form komórkowych. atypowe komórki znajdują się w przewlekłych procesów zapalnych (gruźlicze zapalenie opon mózgowych, stwardnienie rozsiane, itd.), a często są komórki nowotworowe. Prawdopodobieństwo znajduje komórek nowotworowych w płynie mózgowo-rdzeniowym w guzach mózgu jest niska (mniejsza niż 1,5%). Wykrycie komórek hutniczych w CSF w nowotworach hematologicznych sugeruje neuroleukemia.

Analiza składu cieczy jest ważne, aby ocenić stosunek białek i elementów komórkowych (dysocjacji). Gdy dysocjacji komórek białko zauważyć pleocytoza ekspresji w normalnych lub nieco zwiększoną zawartość białka. Jest to typowe dla zapalenia opon mózgowych. Belkovokletochnaya dysocjacji znamienny giperproteinarhiey normalną cytozy. Warunek ten jest typowy dla procesów stojących w mózgowo płynowych (guza, pajęczynówki et al.).

sytuacje kliniczne, czasami wymagają zliczanie liczby erytrocytów krwawe płynu mózgowo-rdzeniowego (na Uprzedmiotowienie objętości krwotok). Liczenie krwinek czerwonych są jak we krwi. Jak wskazano powyżej, w przypadku zmiany barwy napoju w 1 mm, zawiera więcej niż 500-600 erytrocytów widoczne zabarwienie następuje w obecności około 2000, a gdy staje się krwotocznej poziom czerwonych krwinek powyżej 4000 / l

Badania mikrobiologiczne płynu mózgowo

Jedną z najczęściej występujących chorób OUN ropne zapalenie opon mózgowych. W takich przypadkach badanie mikorobiologicheskoe szczególnie pilnych. Obejmuje ona wskazaniem, że badany - bacterioscopy leków i klasyczne techniki hodowli. Bacterioscopy alkohol ma ograniczoną wartość diagnostyczną, szczególnie w wytwarzaniu przejrzystej CSF. Rozmaz przygotowany z roztworu osadu otrzymanego przez odwirowanie okarshivayut błękit metylenowy lub barwienie Grama, chociaż niektórzy autorzy uważają, że najnowsza wersja kolor „uraz” formowane elementy i tworzy artefaktów. Gdy zapalenie opon mózgowych i ropnie znaleźć różne flory w zależności od charakteru choroby. Niezależnie od wyników mikroskopii diagnostyki bakteryjnego zapalenia opon mózgowych należy potwierdzić hodowli teście, który staje się czynnikiem decydującym w diagnostyce tej grupie chorób, a wybór odpowiedniego leczenia. Jest ona prowadzona zgodnie z Zakonu № 375 z Ministerstwa Zdrowia Federacji Rosyjskiej 23.12.98 „O środki w celu wzmocnienia nadzoru i zapobiegania infekcji meningokokowej i ropnego bakteryjnego zapalenia opon mózgowych.” Najczęstszą przyczyną bakteryjnego zapalenia opon mózgowych to Gram-ujemne Diplococcus Neisseria meningitidis, który wynosi 80% przypadków można wykryć nawet gdy mikroskopii.

CSF mikroskopia

Zwykle w płynie mózgowo-rdzeniowym, są obecne tylko limfocyty i monocyty. W różnych chorób i stanów patologicznych w CSF mogą pojawić się inne typy komórek.

Limfocyty są podobne wielkością do czerwonych krwinek. Limfocyty mają duże jądro i wąskie obrzeże cytoplazmy nielakierowanej. Zwykle w płynie mózgowo-rdzeniowym, zawiera 8-10 komórki limfocytów. Ich ilość zwiększa się w guzy ośrodkowego układu nerwowego. Limfocyty występują w przewlekłych procesów zapalnych w muszli (gruźlicze zapalenie opon mózgowych, zapalenie pajęczynówki tsistitserkoznom).

Komórki plazmatyczne w płynie mózgowo-rdzeniowym. Komórki większe niż limfocyty dużych jądrach, usytuowany mimośrodowo, duża ilość cytoplazmy przy stosunkowo małej ilości (rozmiarów jąder komórkowych - 6,12 mm). Komórki plazmatyczne w CSF stwierdzono tylko w patologicznych przypadkach, czas obecnych procesów zapalnych w mózgu i błon z mózgu, gruźlicze zapalenie opon mózgowych, zapalenie pajęczynówki tsistitserkoznom i innych chorób, w okresie pooperacyjnym, kiedy powolnego gojenia ran.

Tkanina monocyty w płynie mózgowo-rdzeniowym. Wielkość komórki - od 7 do 10 mikronów. W normalnym cieczy może czasami występować jako pojedyncze kopie. Monocyty znajdują się w płynie mózgowo-rdzeniowym po zabiegu na ośrodkowy układ nerwowy, z aktualnymi długich procesów zapalnych w muszli. Obecność monocytów tkanki mówi o aktywnej reakcji tkanek i normalnego procesu gojenia się ran.

Makrofagi w płynie mózgowo-rdzeniowym. Mogą mieć rdzenie o różnych kształtach, zazwyczaj znajduje się na peryferiach cytoplazmie komórek rdzeń zawiera wakuole i wtrącenia. W normalnych makrofagów CSF nie występuje. krwawienie lub po zapaleniu obecność makrofagów w prawidłowej liczby komórek w płynie mózgowo-rdzeniowym zaobserwowano. Na ogół występują one w okresie pooperacyjnym, który ma znaczenie prognostyczne i mówi aktywności oczyszczonej cieczy.

Ziarniste kulki do płynu mózgowo-rdzeniowego. Komórki z stłuszczenia - przy obecności makrofagów w cytoplazmie kropelek tłuszczu. W preparatach barwionych komórek płynu mózgowo-rdzeniowego mają małe obwodowe znajduje się rdzeń i cytoplazmy pogorszeniu. Wartość komórki jest różny i zależy od zawartych w nim kropelek tłuszczu. kulki ziarniste znajdujące się w płynie patologicznych otrzymanego z torbieli mózgu w tkance mózgu ognisk załamania nowotworów.

Neutrofili w płynie mózgowo-rdzeniowym. Aparat jest identyczny w formie neutrofili krwi obwodowej. Obecność neutrofili w płynie mózgowo-rdzeniowym, nawet w minimalnych ilościach, lub wskazuje były lub ma odczyn zapalny. Obecność zmiany neutrofili wskazuje tłumienie stanu zapalnego.

Eozynofile w płynie mózgowo-rdzeniowym. Określa się w płynie mózgowo-rdzeniowym o równomiernym, błyszczące ziarna. Eozynofile wystąpić krwotok podpajęczynówkowy, gruźlicę, zapalenie opon mózgowych i syfilitycznych guzów mózgu.

Komórki nabłonkowe w płynie mózgowo-rdzeniowym. komórki nabłonkowe, ograniczając przestrzeni podpajęczynówkowej, znajdują się w płynie mózgowo-rdzeniowym rzadko. To duże komórki o małym okrągłym lub owalnym jądrze okrągłe. Występują w guzach, czasami z procesami zapalnymi.

Komórki nowotworowe kompleksy w płynie mózgowo-rdzeniowym. Można je znaleźć w komórce i barwiono wytwarzanie alkoholu. Komórki nowotworowe mogą być następujące typy nowotworów:

•  rdzeniak;
•  spongioblastoma;
•  gwiaździak;
•  rak.

Kryształy w cieczy. Znajdywane w płynie mózgowo-rdzeniowym, rzadko, jeśli guz dezintegracji.

Elementy Echinococcus w likvore- haki scolexes, chitynę fragmentów powłoki - w płynie mózgowo-rdzeniowym, są rzadkie.

Ług diagnostyka PCR

W ostatnich latach, pewną nadzieję w etiologicznych Neuroinfekcji diagnostyczne związane z rozwojem technik genetycznych, molekularnych do wykrywania kwasów nukleinowych z czynników zakaźnych, w płynie mózgowo-rdzeniowym (diagnostyka PCR).

W ten sposób, ciecz jest średnio wyraźnie reagują z procesów patologicznych ośrodkowego układu nerwowego. Głębokość i charakter jego zmiany są spowodowane głębokości zaburzeń patofizjologicznych. Prawidłowe laboratorium ocena liquorologic objawów pomaga wyjaśnić diagnozy i oceny skuteczności leczenia.